细菌厌氧培养是指在无氧环境培养细菌。厌氧菌是人体内主要的正常菌群,其中梭形杆菌主要存在于上呼吸道和口腔;消化球菌和消化链球菌存在于肠道、口腔、阴道和皮肤等。
1.标本采集
采集标本时,除粪便、咽拭子、痰等标本外,其他样本均应以严格无菌技术采集。采集时间宜于病程的急性期、早期、症状典型期或用药前。采集量不宜太少,标本盛于无菌容器内。标本运送应避免接触空气,必要时床边接种。
2.培养方法
(1)厌氧缸法:将接种标本的平板或液体培养基试管放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学方法除去缸内氧气,造成无氧环境,以利于专性厌氧菌生长。常用的方法有抽气换气法和气体发生袋法。
(2)厌氧袋法:即在无毒、透明不透气的塑料袋内造成无氧环境培养厌氧菌。塑料袋内装入气体发生管、美蓝指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种细菌的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美蓝指示剂管,若美蓝无色表示袋内已达无氧状态,可置于35℃培养箱内孵育。
(3)厌氧手套箱:是公认的培养厌氧菌的最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱前面有一个有机玻璃透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作。这种厌氧箱适于培养基还原、厌氧菌标本接种、分离培养、生化鉴定和体外药敏试验等厌氧菌培养的全套操作。
(4)焦性没食子酸法:在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸,均匀撒上焦性没食子酸,然后再混入碳酸氢钠粉末或滴入氢氧化钠溶液,迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面,用融化的石蜡封边,造成一个封闭空间。焦性没食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养。
(5)疱肉培养基:疱肉和肉汤装入大试管,液面封凡士林,造成无氧环境。
(6)黄磷法:在可密闭的玻璃容器底部装水,上放一块隔板,把接种细菌的培养皿用纸包裹,放在隔板上。在容器上部放一个敷有
碳酸钙的无菌平皿,将黄磷置于其中点燃,立即密闭容器,造成无氧环境。
厌氧菌感染常见于脏器脓肿、
腹膜炎、脓性
胸膜炎、
蜂窝织炎、牙周炎、
盆腔炎和阑尾炎。临床已诊断的厌氧菌感染中,约80%是由拟杆菌属、消化链球菌属和梭菌属这三大类厌氧菌引起,其中最常见的是脆弱拟杆菌、大消化链球菌和产气荚膜梭菌。
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