糖类抗原15-3(CA15-3)是第3个由杂交瘤技术所证实的
肿瘤血清标志物。其生化本质为黏蛋白,属多形上皮黏蛋白,相对分子质量400kD。CA15-3为乳腺癌的标志,主要用于监测乳腺癌的进程及对治疗的反应,但在乳腺癌的早期敏感性较低是其不足。
1.专用商品试剂盒
组成:微孔反应板已包被抗原或抗体的固相载体、酶结合物酶标记的抗原或抗体、显色剂酶作用底物、阴性及阳性对照品、参考标准品和控制血清、洗涤液、酶反应终止液(2mol/LH2SO4硫酸溶液)。
2.仪器
准备酶标仪。
检测CA15-3有化学发光法、免疫放射法等很多方法,最简便和经济实用的方法为酶联
免疫吸附试验(ELISA)。酶联免疫吸附试验操作如下。
1.配制各种试剂,按所需量和比例将生物素化单抗与酶标记单抗混合,稀释待测血清,阴性和阳性对照分别取25μl,加稀释剂1ml。
2.将已包被微孔板条取出,用洗涤液洗1次,拍干。
3.将阴性、阳性对照品,已稀释的待测血清及CA15-3标准品加入到相应孔中,每孔25μl。
4.加入已混合好的抗体溶液,每孔100μl,室温2h,洗板6次,拍干。
5.加H2O2-TMB溶液,每孔100μl,室温30分钟。用酶标仪620nm读取吸光度值。还可加终止液每孔10μl,室温1分钟后在450nm波长读A值。
6.制备标准曲线,以标准品CA15-3浓度为横坐标,各浓度相应A值为纵坐标,可以查到检样中CA15-3浓度。
7.若初试检样CA15-3>250U/ml。应将已稀释标本再作1:10稀释和1:100稀释。所测得的数值各乘以10或100。
<30U/ml。不同的实验室应通过调查本地区不同人群建立自己的参考区间。
1.乳腺癌患者CA15-3升高,主要作为对乳腺癌的辅助诊断指标,对疗效观察,预后判断,复发和转移的诊断也均有重要价值,但早期无诊断价值。
2.肺癌、
结肠癌、胰腺癌、卵巢癌、子宫颈癌、
原发性肝癌等其他恶性肿瘤,也有不同程度的阳性率。
3.肺、胃肠道、肝脏、乳腺、卵巢等非恶性肿瘤性疾病,阳性率一般低于10%。
1.测定CA15-3的试剂盒,其试剂配制、操作等都比较复杂,所以应仔细阅读说明书。
2.不同批号的试剂不相匹配,所以不能混用,也不宜使用过期试剂。
3.从冷藏处取出试剂盒和待测血清后均应恢复至室温,试验应在20~28℃进行。待测血清应缓慢融化并轻轻混匀。
4.酶底物-色原应无色或者略带蓝色,若呈蓝色说明已被污染,应该弃去。
5.洗涤时,洗液应注满各孔,而且不能溢出,吸出时孔中液体要吸尽。若有残留液,应将板条反扣于吸水纸上拍干。
百科内容仅供医学科普使用,不能作为诊断治疗依据,具体请遵医嘱。