人类白细胞抗原配型是指通过血清学或分子生物学技术对供者和受者的
人类白细胞抗原(HLA)的相容性进行检测,其HLA相容性越好,移植后排斥反应的几率越低。由于HLA的复杂性,除同卵双生子之外难以找到配型完全相符的供体和受体,因此HLA配型是器官或干细胞移植前供者选择的重要检测项目。
HLA是人类主要组织相容性复合物(MHC)的产物,其基因位于6号染色体短臂上,是一系列紧密连锁的基因座位构成的具有一定规律性的高度多态性遗传复合体,可分为Ⅰ类、Ⅱ类、Ⅲ类基因区。其中与移植密切相关的有6个编码高度多态性的位点,即Ⅰ类分子HLA-A、HLA-B、HLA-C和Ⅱ类分子HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP。
1.血清学配型
包括细胞依赖的细胞毒分析(CDC)及加入抗球蛋白抗体作为辅助试剂的AHG-CDC、酶联
免疫吸附试验(ELISA)、流式细胞术等方法,其中流式细胞术灵敏度最高。血清学配型的基本原理均为抗原-抗体发生特异性结合。其中CDC是根据补体存在时特异性抗体与抗原结合杀伤细胞,通过观察
淋巴细胞破坏确定待测细胞是否有特异性抗原;ELISA和流式细胞术都是利用酶标记抗体,通过与抗原配置成反应体系进行孵育后,再加入显色底物或用流式细胞仪进行分析。
2.细胞学配型
细胞学配型使用混合淋巴培养技术,由于试验周期长,操作繁琐,现已逐渐淘汰。
3.DNA配型
DNA配型主要通过聚合酶链式反应(PCR)对DNA序列进行扩增,再结合其他技术如核酸探针、凝胶电泳等方式对PCR产物进行检测。由于技术不同其分辨率亦不相同,DNA配型的多为中、高分辨率配型。PCR后常用的方法有:序列特异性寡核苷酸探针(SSOP)、逆向点杂交技术、参考链介导的构象分析(RSCA)、凝胶电泳检测序列特异性引物(SSP)、测序基础配型(SBT)、限制性片段长度多态性(RFLP)、单链构象多态性(SSCP)。此外还可进行DNA测序、基因芯片检测等。
4.氨基酸残基配型
有些抗体对一组抗原均有反应,由此归纳出不同的交叉反应组(CREG),CREG抗体实质是抗公共表位抗体,即HLA特异性抗体的表位是某个或几个氨基酸残基。由不同的氨基酸残基组合可组成不同公共表位的抗原特异性,据此可以进行氨基酸残基配型。
ABO血型抗原、次要组织相容性抗原、组织特异性抗原和HLA是可引起移植物遭受排斥反应的抗原,可导致移植后发生排斥反应(HCGR)和移植物抗宿主反应(GVHD)。供者与受者HLA配型相合程度越高,移植后发生HCGR和GVHD的概率就越低,反之移植极易失败且可对受者产生各种不良影响,因此HLA配型是移植前必须进行的检测项目之一。
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