白细胞介素是由多种细胞产生并介导白细胞间相互作用的一类细胞因子,可调节白细胞的生长和分化,在机体免疫应答过程中起着十分重要的作用。在发生某些免疫性疾病时,体内白细胞介素及其受体表达可发生异常,与机体免疫功能低下或发生病理损伤有关,因此在临床免疫学中也越来越重视对白细胞介素及其受体的检测。
向被检测者解释本操作的目的、方法等,消除顾虑;一般选取静脉血进行检测,采血前一天应清淡饮食、晚8点后避免进食和剧烈运动、避免饮酒以免影响结果,采血时避免情绪紧张。
1.生物学活性检测
(1)促进细胞增殖和增殖抑制法:常用检测细胞增殖的方法有氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法、比色法、染色法和直接计数法等,其中测定细胞代谢酶来反映细胞增殖数的比色法常用,将不同稀释度的待测样品或细胞因子标准品与培养的依赖细胞株共同培养一定时间,用酶标仪检测增殖的细胞数。前者的增殖细胞数与细胞因子的含量成正比,而后者的增殖细胞数与细胞因子的含量成反比。
(2)反向溶血空斑试验:将待测分泌白细胞介素的细胞置于单层经金黄色葡萄球菌A蛋白包被的红细胞中,抗白细胞介素抗体被金黄色葡萄球菌A蛋白固定在红细胞表面并结合待测细胞所分泌的白细胞介素。在补体存在时,白细胞介素和抗体的复合物激活补体,溶解附近的红细胞形成溶血空斑。空斑的大小与细胞分泌白细胞介素的量成正比。
2.免疫学检测
将白细胞介素作为抗原进行定量检测,通过标准品制作标准曲线,再推算样品的含量。目前用于白细胞介素检测的免疫学方法主要有:免疫斑点法、酶联
免疫吸附(ELISA)法、放射免疫分析法、免疫印迹法、酶联免疫斑点法和反向溶血空斑试验。
3.分子生物学方法检测
目前主要有RNA印迹法、核酸保护分析、斑点杂交、原位杂交和逆转录聚合酶链式反应。主要通过细胞因子的基因转录mRNA的量,推断细胞因子的合成量。此法敏感度更高,但是有些细胞尽管有基因转录,但没有蛋白质表达,因此分子生物学方法并不能真实反映细胞的分泌状态,不能完全替代生物学方法或免疫学方法。
4.细胞内白细胞介素的检测
可采用流式细胞术免疫荧光技术,即从单细胞水平检测细胞因子,更确切地反映了不同细胞或细胞亚群产生细胞因子的能力,用多色标记的荧光抗体可在一种细胞内同时测定多种不同的细胞因子。
炎症反应或免疫应答时白细胞介素含量常升高。
1.HIV感染、急性病毒性肝炎等各类病原微生物感染时,白细胞介素1、白细胞介素2、白细胞介素6、白细胞介素9、白细胞介素10含量升高;慢性活动性病毒性肝炎时白细胞介素8含量升高;
中枢神经系统感染时脑脊液中白细胞介素6含量升高;曼氏血吸虫、线虫感染时,白细胞介素4、白细胞介素5和白细胞介素9含量升高。
2.类风湿关节炎、
系统性红斑狼疮等
自身免疫性疾病时,白细胞介素4、白细胞介素6、白细胞介素8、白细胞介素9、白细胞介素10含量升高,而白细胞介素1含量下降。
3.移植排斥反应、预防接种继发性反应时白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素5含量升高,而白细胞介素1含量下降。
4.宫颈癌、
多发性骨髓瘤、
淋巴瘤、
急性单核细胞白血病等白细胞介素6、白细胞介素8含量升高。
百科内容仅供医学科普使用,不能作为诊断治疗依据,具体请遵医嘱。