耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)基因扩增检测是过将细菌所含的基因进行核酸扩增的技术,检测出怀疑有MRSA感染但无症状者体内是否含有此类细菌的检查方法。基因扩增是在体外模拟体内DNA的复制,应用耐热DNA聚合酶,特异性扩增某一DNA片段的技术,具有特异性强,灵敏度高的优点。目前PCR检测mecA基因已经成为MRSA鉴定的金标准。
1.向患者交代病情,告知患者进行检查的目的,帮助患者放松心情。
2.嘱患者正常饮食和睡眠。
测定方法是根据金黄色葡萄球菌TK 784的mec A基因DNA序列设计一引物,再裂解提取被测菌的DNA,在一定条件下进行扩增,经
琼脂电泳后在紫外灯下观察有无与阳性对照菌株(金黄色葡萄球菌ATCC 29 123)相同的区带。简单步骤如下
1.制备模板DNA。
2.引物设计与合成。
3.反应体系配制并进行PCR扩增。
4.琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。
PCR具有较高的灵敏度,只要被测菌有微量的基因,即可出现阳性结果。采用PCR实验方法检测扩增mecA基因,判定菌株是否为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株,已经成为MRSA鉴定的金标准。能够有效指导诊断、治疗和用药。
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