梅毒螺旋体基因扩增检测是指利用基因扩增技术对梅毒螺旋体DNA进行体外核酸扩增,从而诊断梅毒的方法。通过梅毒螺旋体基因扩增检测可早期确诊梅毒感染,尽早治疗梅毒,防止蔓延及病情的恶化。
向被检测者解释本操作的目的、方法等,消除顾虑,选取血液、脑脊液等进行检测。
选择47kDa膜抗原基因(tpp47基因)、39kDa碱性蛋白基因(bmp基因),TPF1蛋白基因或TYF1蛋白基因和TmpA基因等作为引物,向缓冲液中加入引物,在模板DNA存在下,经变性、退火和延伸即可合成产物DNA,经若干个这样的循环后,DNA即得到大量扩增。
1.变性
加热使模板DNA在高温(约94℃)变性,双链间的氢键断裂而形成两条单链。
2.退火
使溶液温度逐渐降至50℃~60℃,模板DNA即可与引物按碱基配对原则互相结合。
3.延伸
再将溶液温度逐渐升至72℃,耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板,在引物的引导下,利用反应混合物的4种脱氧核苷酸,复制出互补DNA。
上述3步为一个循环,样本中的DNA量即可增加一倍,新形成的链又可为下一轮循环的模板。
梅毒螺旋体基因扩增检测脑脊液中的梅毒螺旋体DNA可作为确诊梅毒的主要依据,但本方法不能取代梅毒的血清学反应试验。梅毒螺旋体基因扩增检测血清中的梅毒螺旋体DNA,尚不能作为一种常规的检测方法,同时,本方法不能用于抗菌素对梅毒治疗效果的监测。通过梅毒螺旋体基因扩增还可监测
先天性梅毒患儿梅毒螺旋体是否持续存在、持续的时间等。
百科内容仅供医学科普使用,不能作为诊断治疗依据,具体请遵医嘱。