骨髓与血细胞免疫表型分析是指对骨髓或外周血中的正常或异常细胞进行的免疫分析,包括对正常细胞亚群分析及对异常细胞的系列归属、分化阶段、抗原表达谱的分析及用特有免疫标志物准确计数细胞等。
1.检查前注意事项
(1)向患者及家属解释检查的目的、时间和注意事项(骨髓穿刺后3天内穿刺部位不要着水,保持清洁等)。
(2)患者应避免剧烈运动和劳动,一般要求患者休息15分钟后进行采集。
(3)对怀疑有凝血功能障碍者,在骨髓穿刺前应做凝血功能方面的检查。
2.标本采集
静脉采血2mL或骨髓穿刺术采集骨髓液,一般用
乙二胺四
乙酸或
肝素抗凝,血小板分析时用106mmol/L
枸橼酸钠抗凝血。骨髓穿刺选择穿刺点(一般选髂后或髂前上棘,其次为胸骨、棘突等部位),消毒,用2%
利多卡因逐层做
局部浸润麻醉,穿刺抽取不超过1mL骨髓液。
用单克隆抗体作分子探针,用荧光标记抗体,与血液或骨髓标本反应后制成一定浓度的细胞悬液并放入流式细胞仪的样品管中。细胞在气体压力下进入流动室,在鞘液的约束下,细胞排成单列从流动室的喷嘴高速喷出成为细胞液柱。细胞液柱与入射激光束垂直相交,产生光反射并发出荧光,被光电二极管等接收变为电信号,存储在计算机中,进行显示、分析、统计运算。可获得骨髓、血细胞的一系列重要的物理特征、生化及免疫学特征和功能状态等参数。
根据分析目的不同,参考范围不同。常见
淋巴细胞亚群及其参考范围为:总T细胞(CD3+ CD19-)占50%~84%,总B细胞(CD3- CD19+)占5%~18%,辅助/诱导T细胞(CD3+ CD4+)占27%~51%,抑制/细胞毒T细胞(CD3+ CD8+),辅助/抑制T细胞比值(CD3+ CD4+ CD8-/ CD3+ CD4- CD8+),NK细胞(CD3-/ CD16+ CD56+)占7%~40%。

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