胆红素测定是指对血清中结合胆红素（直接胆红素）和总胆红素进行检测的方法，根据两者差值可以计算出未结合胆红素（间接胆红素）浓度。血清胆红素测定不仅能反映肝脏损害程度，对黄疸的鉴别也尤其重要。

向被检测者解释本操作的目的、方法等，消除顾虑。一般选取静脉血进行检测，采血前1d应清淡饮食，避免饮酒以免影响结果，采血时避免情绪紧张，采血当天需空腹。

1.重氮试剂法

即改良J-G法，也称为对氨基苯磺酸法。取三只试管并标号，其中一支为蒸馏水对照管，另外两支分别检测结合胆红素和总胆红素。按测定物质的种类加入血清和相应的试剂，混合后分光光度计600nm波长比色，以蒸馏水对照管调零，读取各管吸光度，对应标准曲线确定相应胆红素浓度，并计算出未结合胆红素浓度。

2.胆红素氧化酶法

取三只试管并标号，其中一支为蒸馏水对照管，另外两支分别检测结合胆红素和总胆红素，结合胆红素试管加入酸性试剂，总胆红素试管加入碱性试剂，分别在三支试管中加入血清和胆红素氧化酶后立即混匀，置37℃水浴15min，分光光度计460nm波长比色，以蒸馏水对照管调零，读取各管吸光度，确定相应胆红素浓度，并计算出未结合胆红素浓度。

1.血清总胆红素测定可帮助诊断有无黄疸、黄疸的程度及类型，总胆红素在17.1～34.2 umol/L时为隐性黄疸；超过34.2 umoL/L时，肉眼可见皮肤、黏膜、巩膜黄染，为显性黄疸。

2.结合胆红素和血清总胆红素同时测定，两者比值可用于鉴别黄疸类型：①结合胆红素/总胆红素比值小于20％，多见于溶血性黄疸、阵发性血红蛋白尿、恶性贫血、红细胞增多症等；②结合胆红素/总胆红素比值在40％～60％时，多属肝细胞性黄疸；③结合胆红素/总胆红素比值大于60％时，结合胆红素升高十分明显，多属阻塞性黄疸。